Hoe worden vaccins gemaakt?

Enkele belangrijke verwijzingen en links uit dit artikel

Hoe worden cellijnen / celstammen gemaakt?

- Video: Primary Cell culture and cell line/Cell culture basics, https://www.youtube.com/watch?v=9BvTFowr0rI&t=131s (consulted 6 Nov 2024)
- Video: Sub-culturing cells/Cell culture basics, https://www.youtube.com/watch?v=Oo36pvP0TrI (consulted 9 Nov 2024)
- Video: Animal cell culture media, https://www.youtube.com/watch?v=UV7T9JsxdXA  (consulted 9 Dec 2024

L. Hayflick et al., “The Serial Cultivation of Human Diploid Cell Strains,” Experimental Cell Research, Vol 25v(1961), pp 585-621.

The Serial Cultivation of Human Diploid Cell Strains

Leonard Hayflick beschrijft hoe hij de WI-38 cellijn of celstam maakte in 1962
M. Wadman., “Medical research: Cell Division,” Nature, Vol 498 (27 June 2013), pp. 422-426. https://www.nature.com/articles/498422a (niet geraadpleegd, betaalde link) https://www.researchgate.net/publication/242333147_Medical_research_Cell_division (geraadpleegd 12 jan 2025)

Hoe het vermeende “rubellavirus” zogenaamd werd "geïsoleerd" door Stanley Plotkin in 1965

S. Plotkin et al., “Studies of immunization with living rubella virus. Trials in children with a strain cultured from an aborted fetus,” American Journal of Diseases of Children, Volume (1965) 110, pp 381-389. Published online by Semanticscholar: https://www.semanticscholar.org/paper/Studies-of-immunization-with-living-rubella-virus.-Plotkin-Cornfeld/0c65acb5c182860c0c80263e37fdf1c6e40d48b1 or
  AmJDisChildPlotkinRubellaVirus.pdf

S. Plotkin et al., “Attenuation of RA 27/3 Rubella Virus in WI-38 Human Diploid Cells,” American Journal of Diseases of Children, Vol 118 (1969), pp 178-179.  AmJDisChildRA273inWI-38.pdf

Website European Medicines Agency EMA, M-M-R Vaxpro epar scientific discussion, p. 5, https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-discussion/m-m-rvaxpro-epar-scientific-discussion_en.pdf, published 2006, (geraadpleegd 27 nov 2024)

Hoe het vermeende “rubellavirus” vandaag op grote schaal wordt geproduceerd

Website European Medicines Agency EMA, M-M-R Vaxpro epar scientific discussion, p. 6, 
https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-discussion/m-m-rvaxpro-epar-scientific-discussion_en.pdf, published 2006, (geraadpleegd 27 nov 2024)

Hoe virologen vermeende virussen zouden kunnen isoleren als ze dat zouden willen

Er bestaat een groep micro-organismen die net zo klein zijn als vermeende virussen en die door microbiologen zijn geïsoleerd en bestudeerd. Deze worden bacteriofagen genoemd en ze eten bacteriën. Dr. Sabrina Green en Dr. Dustin Edwards leggen uit hoe dit in zijn werk gaat.

• Finding and Isolating Phages by Dr Sabrina Green Ph.D., 6 Jan 2021: 
  Dr. Sabrina Green explains how you can isolate phages after culturing them. 
  https://www.youtube.com/watch?v=Kt0miFrXMaY (geraadpleegd 12 dec 2024)

• Virus Isolation Course by Dr. Dustin Edwards Ph.D.   
  Bacteriophages are microorganisms that can be isolated directly from excrement (poo), sewage water or soil. Here is how you can do this.
  https://dustinedwards.info/virus-isolation/ klik op 'Direct Isolation'. of bezoek https://vimeo.com/220849524 (geraadpleegd 3 feb 2025) 
  

Hoe Jonas Salk halverwege de jaren vijftig zijn poliovaccin in massa produceerde met behulp van apennieren

N. Goldblum et al., “Production of formalinized poliomyelitis vaccine (Salk-type) on a semi-industrial scale”, Bulletin World Health Organisation, Vol 17(1957), pp 1001–1023. https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC2537626/?page=14 (geraadpleegd 18 mei 2025)

Infantile Paralysis Polio Development of Poliomyelitis Vaccine 50664

published 29 Dec 2016 by Periscope Film LLC archive.
Een film uit het midden van de jaren vijftig van de National Foundation for Infantile Paralysis, opgericht door de Amerikaanse president Franklin D. Roosevelt in 1938, om het nieuw ontwikkelde poliovaccin van Salk te promoten.

https://www.youtube.com/watch?v=vghbJh7105g&t=289s (geraadpleegd 18 mei 2025)

Monkey Business: Polio, Measles And How It All Began

Documentaire over de zogenaamde ontdekking van de polio en mazelen virussen, waarin ook de werkelijke oorzaak wordt belicht. 

Met onder andere Dr. Tom Cowan, MD, auteur van ‘The contagon myth’, Andrew Kaufman, MD, Claus Kohlein, MD, Torsten Engelbrech, co-auteurs van ‘Virus mania’ en Jim West, auteur van Virology vs. Toxicology

https://theviraldelusion.substack.com/p/the-viral-delusion-episode-three (ger. 9 okt 2025)

Definitie van woorden die worden gebruikt in de microbiologie en virologie

Stap 1. Het verkrijgen van de benodigde cellen om een “cellijn” te maken

isoleren: een ander woord voor ontleden of uitsnijden van cellen uit een levend dier of mens.

een explantaat : weefsel of orgaan van een organisme. (bijv. vers bloed, niercellen, snot)

primaire cellen: cellen die rechtstreeks uit een levend organisme zijn verkregen.

Stap 2. Voorbereiding van cellen voor kweek

fijnhakken/fragmenteren: soms worden weefsels fijngehakt of gefragmenteerd in kleine stukjes om een celsuspensie te creëren.

trypsine: is een enzym dat wordt gebruikt om het natuurlijke weefsel dat cellen met elkaar verbindt af te breken om een celsuspensie te creëren. Zodra het verbindende weefsel is afgebroken, moet trypsine worden verwijderd omdat het giftig is en de celgroei stopt of vertraagt. Trypsine wordt meestal verwijderd door de celsuspensie te centrifugeren, de supernatantvloeistof (bovenste vloeistof) te verwijderen en de resterende cellen te wassen (spoelen) met PBS (zoutoplossing).

celontbinding: het proces waarbij het natuurlijke weefsel dat cellen met elkaar verbindt, wordt afgebroken. Dit gebeurt meestal met behulp van trypsine. Soms gebeurt dit door de organen of de verzamelde weefsels te vermalen en PBS (zoutoplossing) toe te voegen.

Celsuspensie: een oplossing waarin de cellen groeien als afzonderlijke cellen die in de oplossing zweven, in plaats van als weefsel zoals ze dat van nature in het lichaam doen.
Confluente cellen: cellen die van nature boven op elkaar groeien in weefselvorm.

Supernatant: de bovenste vloeistof nadat de celsuspensie is gecentrifugeerd.

Celpellet: de cellen op de bodem van de reageerbuis nadat de celsuspensie is gecentrifugeerd. (Dit wordt gewassen (gespoeld) met PBS-zoutoplossing om het trypsine te verwijderen.)

Fosfaatbufferzoutoplossing (PBS) / buffer (zoutoplossing): wordt gebruikt om de celpellet te wassen (spoelen) nadat de cellen zijn losgemaakt met trypsine. Het wordt soms ook gebruikt om de PH van de celkweek op 7 (neutraal) te houden.

Stap 3. Laat de cellen groeien/zich vermenigvuldigen

‘celkweekmedium’, ook wel groeimedium (GM) genoemd: vloeibare voeding voor cellen

De meeste microbiologen en virologen gebruiken het zogenaamde Eagle's Medium als celkweekmedium om celculturen te kweken/te cultiveren.

Eagle's Medium  is een celkweekmedium dat is ontwikkeld door Harry Eagle en voor het eerst werd gepubliceerd in Science Magazine in 1959. Het is gebaseerd op zes zouten, glucose, dertien essentiële aminozuren en acht vitamines.

Het gebruikte groeimedium wordt aangevuld met kalfsserum, het bloed van gedode koeienfoetussen, dat wordt afgetapt om celculturen te kweken. Het bloed van koeienfoetussen bevat speciale groeihormonen die nodig zijn om de cellen in een kunstmatige omgeving te laten vermenigvuldigen.

Het groeimedium bevat ook zeer giftige antibiotica, zoals penicilline en streptomycine. Deze worden toegevoegd om de groei van bacteriën in de kweek te stoppen.

Cytopathogene agentia: een ander woord voor virus

Vermenigvuldigen: een ander woord voor kweken of groeien.

Stap 4. Subcultiveren/passeren van de cellen

Subcultiveren/passeren: het verdelen van een celsuspensie in twee of meer ‘subculturen’.

Subcultiveren gebeurt meestal nadat de cellen in een celkweek ‘confluent’ zijn geworden en niet meer groeien. Trypsine wordt meestal gebruikt om het natuurlijke weefsel dat de cellen met elkaar verbindt te verbreken, zodat ze kunnen worden verdeeld in twee of meer ‘subculturen’.

Interview met Leonard Hayflick in juli 2011 (deel 50): Hoe je je eigen cellen kunt isoleren (Interviewer Christopher Sykes)

Hayflick legt in zijn eigen woorden uit hoe trypsine wordt gebruikt om de cellen in een celkweek te scheiden. Hij beschrijft ook hoe ze serum, dat wil zeggen bloed van kalveren en andere dieren, gebruiken om de cellen in de celculturen te ‘voeden’ en in leven te houden.

https://www.webofstories.com/play/leonard.hayflick/50

(geraadpleegd 7 jan 2025)

Interview met Leonard Hayflick in juli 2011 (deel 51): Celdeling (Interviewer Christopher Sykes)

Hayflick legt het proces uit van het losmaken van cellen met behulp van trypsine en het subcultiveren of passeren van celculturen.

https://www.webofstories.com/play/leonard.hayflick/51

(geraadpleegd 29 jan 2025)

Hoe virologen vermeende virussen zouden kunnen isoleren als ze dat zouden willen

Er bestaat een groep micro-organismen die even klein zijn als vermeende virussen en die al tientallen jaren door microbiologen worden geïsoleerd en bestudeerd.

Deze worden bacteriofagen genoemd en ze eten bacteriën.

Bacteriofagen zijn micro-organismen die rechtstreeks kunnen worden geïsoleerd uit uitwerpselen (poep), rioolwater of grond.

Als virologen echt virussen zouden willen isoleren, zouden ze precies dezelfde methoden kunnen gebruiken. Hier volgt hoe je dat kunt doen.

Video: Virus Isolation Course byDr. Dustin Edwards Ph.D.

https://dustinedwards.info/virus-isolation/ klik op ‘Direct Isolation’. Of ga naar https://vimeo.com/220849524 (geraadpleegd 12 dec 2024)